根據(jù)基因整合位點的確定性，可分為：

• 定點條件性基因過表達

• 隨機整合轉(zhuǎn)基因

定點條件性基因過表達

Rosa26位點是目前最為常用的定點整合位點之一。它位于小鼠6號染色體，是一個非編碼基因，已被證明在大部分組織和細胞中都有表達。表達比較活躍的基因區(qū)域因為需要轉(zhuǎn)錄因子的進入基因組結(jié)構(gòu)不會被異染色質(zhì)化，因此在這個區(qū)域定點插入外源DNA，在各組織中表達的可能性都非常高。所以，Rosa26被廣泛用來作為外源基因表達的安全位點。

利用Cre-LoxP系統(tǒng)對目的基因進行可誘導(dǎo)表達調(diào)控。構(gòu)建Rosa26-(SA/pCAG)-loxp-Stop-loxp-cDNA-pA 重組載體，將條件性過表達結(jié)構(gòu)插入到Rosa26基因intron1中。該類型Knockin小鼠可與各類表達Cre重組酶的工具鼠雜交，獲得組織特異性表達外源基因的條件性過表達小鼠模型。

• 可避免隨機整合轉(zhuǎn)基因模型中多拷貝數(shù)、多位點插入、表達不穩(wěn)定、需要建系等煩惱
  

• 可實現(xiàn)外源基因穩(wěn)定的可調(diào)控表達，避免全身性基因過表達可能導(dǎo)致的不可預(yù)測的異常表型

• 可進行超大片段（20-30kb）定點整合

• 除Rosa26位點以外，另有多個位點可供選用，滿足不同研究需求

• 可用于基因功能、蛋白功能的過表達研究

• 可用于KO表型的Rescue實驗

• 可用于在沒有人同源基因的情況下的人源基因表達模型

• 可用于人類疾病基因突變

隨機整合轉(zhuǎn)基因

利用高效PB轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)，更高效地獲得轉(zhuǎn)基因小鼠模型。將目的片段克隆至PiggyBAC轉(zhuǎn)座子質(zhì)粒中，與轉(zhuǎn)座酶一起注射到小鼠受精卵中；在轉(zhuǎn)座酶作用下，目的片段會被整合到基因組上的TTAA位點處，獲得轉(zhuǎn)基因小鼠。由于piggyBac轉(zhuǎn)座子在轉(zhuǎn)座酶的輔助下特異性識別基因組中5’-TTAA-3’位點，精確地剪切和插入不留下印跡，并且在隨機插入基因組的過程中，更傾向于插入有活躍轉(zhuǎn)錄的位置，故而能夠大幅提高轉(zhuǎn)基因小鼠外源基因的表達陽性率。

• 快速高效獲得轉(zhuǎn)基因首建鼠Founder

• 可利用熒光素酶報告基因，通過活體成像系統(tǒng)快速判斷Founder鼠目的基因表達

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