保種服務(wù)
胚胎凍存
方法:將超排后的雌鼠與目的雄鼠進(jìn)行交配,第二天取2細(xì)胞進(jìn)行慢速冷凍,存放于液氮中。
優(yōu)勢(shì):慢速冷凍的胚胎復(fù)蘇后成活率高(80%以上),且移植后的大小鼠懷孕率及產(chǎn)仔率高。
缺點(diǎn):操作難度高,需要高昂的程序冷凍儀,操作時(shí)間達(dá)到6個(gè)小時(shí)。
胚胎復(fù)蘇
目的:將凍存胚胎進(jìn)行復(fù)蘇、移植獲得所需的大小鼠 。
方法:將凍存的胚胎從液氮中取出,室溫解凍,放入相應(yīng)的復(fù)蘇液中進(jìn)行復(fù)蘇操作。將存活的卵移植入假孕母鼠體內(nèi),獲得所需要大小鼠。
精子凍存
方法:將雄鼠處死取出精子通過(guò)快速冷凍保存于液氮中
優(yōu)勢(shì):操作速度快,精子保存量大。
缺點(diǎn):復(fù)蘇時(shí)需要進(jìn)行體外受精,且受精率低(一般為15%-25%)
精子復(fù)蘇
目的:將凍存精子進(jìn)行復(fù)蘇獲得所需的大小鼠。?
方法:將凍存的精子從液氮中取出放置于37度10分鐘后轉(zhuǎn)入TYH中進(jìn)行精子獲能,獲能后的精子通過(guò)體外受精的方式獲得受精卵,移植入假孕母鼠體內(nèi),獲得所需要的大小鼠。
胚胎復(fù)蘇
目的:將凍存胚胎進(jìn)行復(fù)蘇、移植獲得所需的大小鼠 。
方法:將凍存的胚胎從液氮中取出,室溫解凍,放入相應(yīng)的復(fù)蘇液中進(jìn)行復(fù)蘇操作。將存活的卵移植入假孕母鼠體內(nèi),獲得所需要大小鼠。
精子復(fù)蘇
目的:將凍存精子進(jìn)行復(fù)蘇獲得所需的大小鼠。?
方法:將凍存的精子從液氮中取出放置于37度10分鐘后轉(zhuǎn)入TYH中進(jìn)行精子獲能,獲能后的精子通過(guò)體外受精的方式獲得受精卵,移植入假孕母鼠體內(nèi),獲得所需要的大小鼠。
熱門文章
Cre-ERT2在無(wú)Tamoxifen誘導(dǎo)的情況下,在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)處于無(wú)活性狀態(tài);當(dāng)Tamoxifen誘導(dǎo)后,Tamoxifen的代謝產(chǎn)物4-OHT(雌激素類似物)與ERT結(jié)合,可使Cre-ERT2進(jìn)核發(fā)揮Cre重組酶活性。
查看你一定聽(tīng)說(shuō)過(guò)Cre-lox重組系統(tǒng),無(wú)論你是否直接進(jìn)行過(guò)基因操作。由于Cre-lox系統(tǒng)具有操作簡(jiǎn)單、重組率高的優(yōu)點(diǎn),如今已經(jīng)成為體內(nèi)外遺傳操作的強(qiáng)有力工具。利用Cre-lox系統(tǒng),可以在特定細(xì)胞、組織或整個(gè)生物體,甚至在特定時(shí)間點(diǎn)敲除或表達(dá)某個(gè)基因,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因的時(shí)空特異性操作,這對(duì)基因功能的研究和人類疾病動(dòng)物模型的建立都具有深刻影響。
查看